用于电泳的介质有哪些 尽量详细 谢谢 , 蛋白质电泳电泳有哪几种?最好比较全啊。谢谢了! -凯发k8娱乐

⑵ 高压电泳:1000v~5000v,电泳时间短,有时只需几分钟,多用于氨基酸、多肽、核苷酸和糖类等小分子物质的分离。纸电泳和醋酸纤维薄膜电泳 纸电泳是用滤纸作支持介质的一种早期电泳技术。尽管分辨率比凝胶介质要差,但由于

按支持物的物理性状不同,电泳可分为:(1)滤纸为支持物的纸电泳;(2)粉末电泳: 如纤维素粉,淀粉,玻璃粉电泳;(3)凝胶电泳:如琼脂,琼脂糖,硅胶,淀粉胶,聚丙烯酰胺凝胶电泳;(4)缘线电泳:如尼龙丝,人造丝电泳

(1)琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳 琼脂糖是一种线性多糖聚合物,是从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的电泳介质,其密度是由琼脂糖的浓度决定的。经过化学修饰的低熔点(lmp)的

1、醋酸纤维素薄膜电泳 :醋酸纤维素薄膜电泳是以醋酸纤维素薄膜为支持物,它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成。醋酸纤维素膜薄是一种细密而又薄的微孔膜。醋酸纤维素膜对样品的吸附性较小,因此,少量的

利用电泳可以确定胶体微粒的电性质,向阳极移动的胶粒带负电荷,向阴极移动的胶粒带正电荷。一般来讲,金属氢氧化物、金属氧化物等胶体微粒吸附阳离子,带正电荷;非金属氧化物、非金属硫化物等胶体微粒吸附阴离子,带负电荷。

tae tbe 最常见用于dna电泳缓冲液,或聚丙烯酰胺电泳 配制方法参见《分子克隆》第三版 蛋白质电泳sds-page,也可参见该书

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根据所用的支持物不同可分为:纸电泳法、醋酸纤维素薄膜电泳法、聚丙烯酰胺凝胶电泳法和十二烷基硫酸纳(sds)聚丙烯酰胺凝胶电泳法。(3)高效毛细管电泳:是在一根内径约50μm的毛细管中,在高压电场下进行样品分离分析的一

醋酸纤维素膜经过冰醋酸乙醇溶液或其它透明液处理后可使膜透明化有利于对电泳图谱的光吸收扫描测定和膜的长期保存。2、凝胶电泳 凝胶电泳以淀粉胶、琼脂或琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶等作为支持介质的区带电泳法称为凝胶电泳。

琼脂糖凝胶电泳,聚丙烯酰胺凝胶电泳在使用上没啥差别。 醋酸纤维薄膜电泳用的装置有不同,上样有差异。 纸电泳好像不太用了。

1、醋酸纤维素薄膜电泳 :醋酸纤维素薄膜电泳是以醋酸纤维素薄膜为支持物,它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成.醋酸纤维素膜薄是一种细密而又薄的微孔膜.醋酸纤维素膜对样品的吸附性较小,因此,少量的样品,

dna电泳一般使用的都是琼脂糖凝胶电泳,电泳的驱动力靠dna骨架本身的负电荷.蛋白质电泳(一般指sds-page)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的sds上所携带的负电荷.所以相同点就是样品都是带负电

比较醋酸纤维薄膜电泳,琼脂糖凝胶电泳和聚丙乙烯酰胺凝胶电泳

1、农业生产:土壤的保肥作用.土壤里许多物质如粘土,腐殖质等常以胶体形式存在.2、医疗卫生:血液透析,血清纸上电泳,利用电泳分离各种氨基酸和蛋白质.3、日常生活:制豆腐原理(胶体的聚沉)和豆浆牛奶,粥,明矾净水.4、自然地理

⑶ 琼脂凝胶电泳(agar gel electrophoresis)⑷ 聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis)(page)⑸ sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sds-page)。电泳法,是指带电荷的供试品(蛋白质、核苷酸等)在惰性支持介质(如

(二)凝胶电泳 (三)等电聚焦电泳技术 (四)其他电泳技术 希望对您有所帮助

sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳:最常用的变性电泳,可以用来测定蛋白质分子量。比层析法测定要好。

蛋白质电泳电泳有哪几种?最好比较全啊。谢谢了!

一、支持介质不同 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:是以聚丙烯酰胺凝胶作为支持介质的一种常用电泳技术 2、琼脂糖凝胶电泳:是用琼脂或琼脂糖作支持介质的一种电泳方法 二、用途不同 1、聚丙烯酰胺凝胶电泳:用于分离蛋白质和寡核苷酸

可用于测ph 值和蛋白质的亚基数。

sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳:最常用的变性电泳,可以用来测定蛋白质分子量。比层析法测定要好。

4、等电聚焦电泳 :等电聚焦电泳是利用具有ph梯度的电泳介质来分离等电点(pi)不同的蛋白质的电泳技术.这是六十年代后期才发展起来的新技术,基本原理是在制备聚丙烯胺胶凝胶时,在胶的混合液中加入载体两性电解质(商品名amp

几种蛋白质凝胶电泳方法的区别和用途

1、醋酸纤维素薄膜电泳 :醋酸纤维素薄膜电泳是以醋酸纤维素薄膜为支持物,它是纤维素的醋酸酯,由纤维素的羟基经乙酰化而制成.醋酸纤维素膜薄是一种细密而又薄的微孔膜.醋酸纤维素膜对样品的吸附性较小,因此,少量的样品,甚至大分子物质都能得以较高的分辨率.又由于醋酸纤维素薄膜亲水性较小,故电渗作用也较小,并且它所容纳的缓冲液也较少,因此电流的大部分由样品传导,可以加速样品分离,大大节约电泳时间.醋酸纤维素具有操作简单、快速、价廉、定量容易等优点,尤其较纸电泳分辨力强、区带清晰、灵敏度高和便于保存、照相等,目前醋酸纤维素薄膜电泳己取代纸电泳而被广泛应用于科学实验、生化产品分析和临床化验,如分析检测血浆蛋白、脂蛋白、糖蛋白、胎儿甲种球蛋白、体液、脊髓液、脱氢酶、多肽、核酸及其他生物大分子,为心血管疾病、肝硬化及某些癌症鉴别诊断提供了可靠的依据,因而已成为医学和临床检验的常规技术. 2、 琼脂糖凝胶电泳 :琼脂糖凝胶电泳是一种以琼脂糖凝胶为支持物的凝胶电泳,其分析原理与其它支持物电泳的最主要区别是:它兼有“分子筛”和“电泳”的双重作用.琼脂糖凝胶具有网络结构,直接参与带电颗粒的分离过程,在电泳中,物质分子通过空隙时会受到阻力,大分子物质在泳动时受到的阻力比小分子大,因此在凝胶电泳中,带电颗粒的分离不仅依赖于净电荷的性质和数量,而且还取决于分子大小,这就大大地提高了分辨能力.琼脂糖系天然的琼脂加工制得,天然琼脂是一种多聚糖,主要由琼脂糖(约占80%)及琼脂胶组成.琼脂糖是由半乳糖及其衍生物构成的中性物质,不带电荷.而琼脂胶是一种含硫酸根和羧基的强酸性多糖,由于这些基团带有电荷,在电场作用下能产生较强的电渗现象.所以常用于血清蛋白、血红蛋白、脂蛋白、糖蛋白、乳酸脱氢酶、碱性磷酸酶等同工酶的分离和鉴定,为临床某些疾病的鉴别诊断提供了可靠的依据.与免疫化学反应相结合发展成为免疫电泳技术,用于分离和检测抗原.可对目前常用的琼脂糖进行某些修饰,如引入化学基团羟乙基,则可使琼脂糖在65℃左右便能熔化,被称为低熔点琼脂糖.该温度低于dna的熔点,而且凝胶强度又无明显改变.以此为支持物进行电泳,称为低熔点琼脂糖凝胶电泳,主要应用于dna研究.如dna鉴定,dna限制性内切酶图谱制作等,为dna分子及其片段分子量测定和dna分子构象的分析提供了重要手段. 3、聚丙烯酰胺凝胶电泳 :聚丙烯酰胺凝胶是由单体丙烯酰胺和交联剂又称为共聚体的n,n’-甲叉双丙烯酰胺(简称bis)在加速剂和催化剂的作用下聚合交联成三维网状结构的凝胶,以此凝胶为支持物的电泳称为聚丙烯酰胺凝胶电泳(简称page).应用范围广,可用于蛋白质、酶、核酸等生物大分子的分离、定性、定量及少量的制备,还可测定分子量、等电点等. 4、等电聚焦电泳 :等电聚焦电泳是利用具有ph梯度的电泳介质来分离等电点(pi)不同的蛋白质的电泳技术.这是六十年代后期才发展起来的新技术,基本原理是在制备聚丙烯胺胶凝胶时,在胶的混合液中加入载体两性电解质(商品名ampholine).这种载体两性电解质是一系列含有不同比例氨基及羧基的氨羧酸混合物,其分子量在300~1000范围内,它们在ph2.5~11.0之间具有依次递变但相距很近的等电点,并且在水溶液中能够充分溶解.含有载体两性电解质的凝胶,当通以直流电时,载体两性电解质即形成一个从正极到负极连续增加的ph梯度.如果把蛋白质加人此体系中进行电泳时,不同的蛋白质即移动并聚焦于相当其等电点的位置.好的载体两性电解质应具有以下特点:在等电点处有足够的缓冲能力,不易被样品等改变其ph梯度;必须有均匀的足够高的电导,以便使一定的电流通过;分子量不宜太大,便于快速形成梯度并从被分离的高分子物质中除去;不与被分离物质发生化学反应或使之变性等.ampholine是一种常用的载体两性电解质.要取得满意的等电聚焦电泳分离结果,除有好的载体两性电解质外,还应有抗对流的措施,使已分离的蛋白质区带不致发生再混合.要消除这种现象,办法之一加入抗对流介质,用得最多的抗对流支持介质是聚丙烯酰胺凝胶. 等电聚焦电泳与其它区带电泳比较具有更高的分辨率,等电点仅差0.01ph的物质即可分开;具有更好的浓缩效应,很稀的样品也可进行分离,并且可直接测出蛋白质的等电点.所以此技术在高分子物质的分离、提纯和鉴定中的应用日益广泛.但是等电聚焦电泳技术要求有稳定的ph梯度和使用无盐溶液,而在无盐溶液中蛋白质易发生沉淀.
(1)琼脂糖和聚丙烯酰胺凝胶电泳 琼脂糖是一种线性多糖聚合物,是从红色海藻产物琼脂中提取而来的。当琼脂糖溶液加热到沸点后冷却凝固便会形成良好的电泳介质,其密度是由琼脂糖的浓度决定的。经过化学修饰的低熔点(lmp)的琼脂糖,在结构上比较脆弱,因此在较低的温度下便会熔化,可用于dna片段的制备电泳。 聚丙烯酰胺凝胶主要有两种方式:一是用于分离和纯化双链dna片段的非变性聚丙烯酰胺凝胶。在未变凝胶中分离dna的缺点是dna的迁移率受碱基组成和序列的影响。由于无法得知未知dna的迁移是否反常,故不能用未变性的聚丙烯酰胺凝胶电泳确定双链dna的大小。二是用于分离及纯化单链dna片段的变性聚丙烯酰胺凝胶。这类聚丙烯酰胺凝胶是在核苷酸碱基配对抑制剂(尿素或甲酰胺)的存在下聚合而成,变性dna的移动速度同其碱基组成及序列几乎完全无关,故可用于分离及纯化单链dna片段和dna测序等。 (2)脉冲电场凝胶电泳 普通的凝胶电泳技术显然是无法分离如此超大分子量的dna分子的。1984年,d.c.schwartz和c.r.cantor发明的脉冲电场凝胶电泳技术,可以成功地用来分离整条染色体这样的超大分子量的dna分子。在常规的琼脂糖凝胶电泳中,超过一定大小范围的所有的双链dna分子,都是按相同的速率迁移的。这是因为它们在单向恒定电场的作用下,仅以“一端向前”的方式游动穿过整个胶板。而在脉冲电场中,dna分子的迁移方向是随着所用的电场方向的周期性变化而不断改变的。 在标准的pfge中,头一个脉冲的电场方向与核酸移动方向成45°夹角,而下一个脉冲的电场方向与核酸移动方向在另一侧亦成45°夹角。由于加压在琼脂糖凝胶上的电场方向、电流大小及作用时间都在交替地变换着,这就使得dna分子能够随时地调整其游动方向,以适应凝胶孔隙的无规则变化。与分子量较小的dna分子相比,分子量较大的dna分子需要更多的次数来更换其构型和方位,以使其可以按新的方向游动。因此,在琼脂糖介质中的迁移速率也就显得更慢一些,从而达到分离超大分子量dna分子的目的。应用脉冲电场凝胶电泳技术,可成功地分离到分子量高达107bp的dna大分子。
聚丙烯酰胺凝胶电泳:这是一种活性电泳,可以分析混合样品,并且可用特异检测手段检测目标物条带。 sds—聚丙烯酰胺凝胶电泳:最常用的变性电泳,可以用来测定蛋白质分子量。比层析法测定要好。
fermentas 我们用过,很不错,5ul电泳转膜都很清楚
dna电泳一般使用的都是琼脂糖凝胶电泳,电泳的驱动力靠dna骨架本身的负电荷。 蛋白质电泳(一般指sds-page)一般使用的都是聚丙烯酰胺凝胶电泳,电泳的驱动力靠与蛋白质结合的sds上所携带的负电荷。 所以相同点就是样品都是带负电荷的,从负极向正极移动,移动的距离都和样品的分子量有关。而且这两个电泳体系可以互相交换使用。进行大分子蛋白质电泳时,可以考虑换用琼脂糖凝胶,因为该体系孔径大。相反,如果需要精确到各位数碱基的dna电泳也可以使用聚丙烯酰胺凝胶系统,因为使用该系统可以将相差一个碱基的两条dna链分开。 不同点首先是样品不同。这个就不用多说了。其次是结果的观察方法不同。dna电泳普遍使用eb做染料,在紫外灯下观察;而蛋白电泳使用的考马斯亮蓝染色,还需要经过脱色步骤,不过观察起来比较简单。还有就是胶体系的差别,dna电泳通常是一胶跑到底,而蛋白质电泳则会有分离胶和浓缩胶之区别。 电泳中样品移动的本质确实是样品所携带的电荷。但是,区分这些条带直接可以用分子量而无需使用电荷数,是因为这些样品的电荷/分子量比都是恒定的了。以dna分子为例,它在电泳中的移动是靠其骨架中磷酸所携带的负电荷来实现的,而这个磷酸分子又是每一个核苷酸中都有的,所以dna分子所携带的负电荷数是由其核苷酸总数决定的。而且,dna分子中核苷酸的组成动辄成百上千,在如此大的分子量面前,讨论单个核苷酸之间分子量的差别就显得毫无意义。这样,dna分子中负电荷的量就可以用dna的分子量来代替,反过来,dna的分子量也就可以用dna分子所携带的电荷来代替(一句话,dna分子的电荷/分子量比是恒定的)。 这在蛋白电泳中(特别是sds-page中)是一样的。在sds-page中,sds将蛋白质变性成直线分子并紧密包裹于其上,使得其所携带的电荷与蛋白分子量成了一定的比例,剩下的就和核酸电泳一样了。 至于为什么核酸的横着跑,蛋白竖着跑,个人认为最大的问题是蛋白制胶的过程导致的。蛋白制胶由于使用了两种不同的凝胶系统,所以需要一个水平的分界面。这个分界面在配胶的过程中是依靠异丙醇在重力作用下的压力下形成的。所以,一并就竖着跑了~~ 你也是搞生化的?
sds-page用来分离蛋白质的,而且是先将蛋白的高级结构变性成1级结构,之后根据蛋白质量大小分离的。 琼脂糖是分离dna的,原理也是根据质量大小分离
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